導讀：大鼠elisa試劑盒代測實驗時為什么需要保溫?因為elisa屬固相免疫測定，抗原、抗體的結合只在固相表面上發生。以抗體包被的夾心法為例，加入板孔中的標本，其中的抗原并不是都有均等的和固相抗結合的機會，只有貼近孔壁的一層溶液中的抗原直接與抗體接觸。這是一個逐步平衡的過程，因此需經擴散才能達到反應的終點。
在elisa中一般有兩次抗原抗體反應，即加標本和加酶結合物后。保溫的方式除有的elisa儀器附有特制的電熱塊外，一般均采用水浴，可將elisa板置于水浴箱中，elisa板底應貼著水面，使溫度迅速平衡。為避免蒸發，板上應加蓋，也可用塑料貼封紙或保鮮膜覆蓋板孔，此時可讓反應板漂浮在水面上。
若用保溫箱，大鼠ELISA試劑盒代測應放在濕盒內，濕盒要選用傳熱性良好的材料如金屬等，在盒底墊濕的紗布，后將elisa板放在濕紗布上。濕盒應先放在保溫箱中預溫至規定的溫度，特別是在氣溫較低的時候更應如此。無論是水浴還是濕盒溫育，反應板均不宜疊放，以保證各板的溫度都能迅速平衡。室溫溫育的反應，操作時的室溫應嚴格限制在規定的范圍內，標準室溫溫度是指20～25℃，但具體操作時可根據說明書的要求控制溫育。
室溫溫育時，大鼠ELISA試劑盒代測只要平置于操作臺上即可。應注意溫育的溫度和時間應按規定力求準確。為保證這一點，一個人操作時，一次不宜多于兩塊板同時測定。
大鼠ELISA試劑盒代測實驗中注意事項
1． elisa試劑盒應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。
2． 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。
3． 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。elisa試劑盒不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
4． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物a、b液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
5． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
6． 洗滌酶標板時應充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
7． 底物a應揮發，避免長時間打開蓋子。底物b對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取od值。
8． 加入elisa試劑盒的順序應一致，elisa試劑盒以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
9． 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。