48t/96t 鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒
簡單介紹
48t/96t 鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒的詳細介紹
【中文名】大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒
【別名】大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA Kit
【貨號】fk-m106
【供應商】上海古朵
【規格】48T/96T
【產品保存】2-8℃,有效期6個月
【銷售】量大從優、質量保證。
【產品特點】敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
【產品用途】用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
【檢測種屬】大小鼠、人、豚鼠、兔子、豬、犬、牛羊、雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
【常見ELISA試劑盒】白介素、選擇素、集落刺激因子、腫瘤壞死因子、干擾素、轉化生長因子、趨化因子、細胞因子受體、粘附分子、生長因子、凋亡因子等等。

大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
標本的處理:
(1)細胞培養上清液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
(2)腦脊液
根據需要用試劑盒中的標準稀釋液稀釋樣品,然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
(3)血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液,5,000×g,15分鐘,4℃,分離血漿樣品,然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標準稀釋液109倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質影響檢測,按照說明書方法檢測。
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒適用領域:
1.免疫酶染色各種細胞內成份的定位
2.研究抗酶抗體的合成
3.顯現微量的免疫沉淀反應
4.定量檢測體液中抗原或抗體成份
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基ELISA試劑盒樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存備用。標本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
6. 標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒操作步驟:
1. 編號:將樣品對應微孔按序編號,每板應設陰性對照2 孔、陽性對照2 孔、空白對照1孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)。
2. 加樣:分別在陰、陽性對照孔中加入陰性對照、陽性對照 50μl。然后在待測樣品孔先加樣品稀釋液 40μl,然后再加待測樣品 10μl。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30 分鐘。
4. 配液:將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用。
5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30 秒后棄去,如此重復5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
7. 顯色:每孔先加入顯色劑A 50μl,再加入顯色劑B 50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15 分鐘。
8. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
9. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

大鼠可溶性核因子κB受體活化因子配基(sRANKL)ELISA試劑盒注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結晶,這屬于正常現象,水浴加熱使結晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經稀釋5倍,終結果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
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