48t/96t 綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒用途
簡單介紹
48t/96t 綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒用途的詳細介紹
中文名:綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒
別名:綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA Kit
貨號:fk-m00120
供應商:上海古朵
規格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
庫存狀態:現貨供應。
保 存:2-8℃,避光保存。
適用范圍:僅用于科研實驗,禁用于臨床。
性能:敏感性高,特異性強,重復性。
特點:敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存,操作簡便。
用途:用于測定血清,血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
ELISA試劑盒種屬:人、大鼠、小鼠、豚鼠、兔子、豬犬、牛羊、雞鴨、植物ELISA試劑盒等。
試劑盒檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒組成:
1.30 倍濃縮洗滌液 20ml×1 瓶 ;
2. 酶標試劑 6ml×1 瓶 ;
3. 酶標包被板 12 孔×8 條 ;
4 .樣品稀釋液 6ml×1 瓶 ;
5 .顯色劑A 液 6ml×1 瓶 ;
6 .顯色劑B 液 6ml×1/瓶 ;
7 .終止液 6ml×1 瓶;
8. 標準品(48ng/ml) 0.5ml×1 瓶;
9 .標準品稀釋液 1.5ml×1 瓶;
10. 說明書 1 份;
11.封板膜 2 張;
12. 密封袋 1 個;
ELISA試劑盒試劑準備:
1. 使用前將所有的試劑和標本緩慢均衡至室溫(18-25oC),試劑不能直接在37oC溶解。
2. 標準品(凍干品):每瓶標準品加入標準品稀釋液1mL,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為2000pg/mL。準備7個稀釋標準品的EP管,每個EP管中加入150μL的標準品稀釋液,如圖所示依次倍比稀釋成不同的梯度, 標準品稀釋液(0pg/mL)直接作為空白孔。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒用途技術流程:
雙抗體夾心法(檢測未知抗原)
1、用緩沖液將抗體稀釋至1-10ug/ml。在反應孔中加0.1ml,4℃ 過夜。次日,棄去孔內溶液,用洗滌緩沖液洗3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃ 孵育1小時。然后洗滌(同時做空白孔,陰性對照孔及陽性對照孔)。
3、加酶標抗體:于各反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標抗體(經滴定后的稀釋度)0.05ml。37℃ 孵育0.5~1小時,洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒用途 間接法(檢測未知抗體)
1、用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1-10ug/ml, 每孔加0.1ml,4℃過夜。次日洗滌3次。
2、加樣:加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.05ml于上述已包被之反應孔中,置37℃孵育1小時,洗滌。(同時做空白、陰性及陽性孔對照)
3、加酶標抗體:于反應孔中,加入新鮮稀釋的酶標第二抗體(抗抗體)0.05ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,后一遍用DDW洗滌。
4、加底物液顯色:于各反應孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃ 10~30分鐘。
5、終止反應:于各反應孔中加入2M硫酸0.05ml
6、結果判定:可于白色背景上,直接用肉眼觀察結果:反應孔內顏色越深,陽性程度越強,陰性反應為無色或淺,依據所呈顏色的深淺,以“+”、“-”號表示。也可測OD值:在ELISA檢測儀上,于450nm(若以ABTS顯色,則410nm)處,以空白對照孔調零后測各孔OD值,若大于規定的陰性對照OD值的2.1倍,即為陽性。
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒用途操作步驟:
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50l,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40l,然后再加待測樣品10l(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50l,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50l,再加入顯色劑B50l,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50l,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA檢測試劑盒注意事項:
1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。
2.濃洗滌液可能會有結晶析出,稀釋時可在水浴中加溫助溶,洗滌時不影響結果。
3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。
4.請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔一孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請后乘以總稀釋倍數(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物請避光保存。
7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.
8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9.本試劑不同批號組分不得混用。
10.如與英文說明書有異,以英文說明書為準。
綿羊白介素1β(IL-1β)ELISA試劑盒用途性能:
1. 準確性:標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值,大于等于0.9900。
2. 靈敏度:zui低檢測濃度小于(參考說明書)
3. 特異性:不與其它可溶性結構類似物交叉反應。
4. 重復性:板內、板間變異系數均小于15%。
5. 貯藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6個月
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