48t/96t 人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒
簡單介紹
48t/96t 人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒
別名:人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA Kit
貨號:fk-m00127
供應商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2-8℃
有效期:6個月
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好。
使用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床。
產品用途:用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
檢測種屬:大小鼠,人,豚鼠,兔子,豬,犬,牛羊,雞鴨ELISA試劑盒等種屬。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本。例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本。

人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒標本的采集及保存:
1. 血清:全血標本請于室溫放置2小時或4℃ 后于1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
2. 血漿:可用EDTA或肝素作為抗凝劑,標本采集后30分鐘內于2 - 8° C 1000 x g離心15分鐘,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
3. 細胞培養(yǎng)物上清或其它生物標本:1000 x g離心20分鐘,取上清即可檢測,或將標本放于-20℃或-80℃保存,但應避免反復凍融。
注:標本溶血會影響后檢測結果,因此溶血標本不宜進行此項檢測。
應用范圍:
ELISA法是免疫診斷中的一項新技術,現已成功地應用于多種病原微生物所引起的傳染病、寄生蟲病及非傳染病等方面的免疫診斷。也已應用于大分子抗原和小分子抗原的定量測定,根據已經使用的結果,認為ELISA法具有靈敏、特異、簡單、快速、穩(wěn)定及易于自動化操作等特點。不僅適用于臨床標本的檢查,而且由于一天之內可以檢查幾百甚至上千份標本,因此,也適合于血清流行病學調查。本法不僅可以用來測定抗體,而且也可用于測定體液中的循環(huán)抗原,所以也是一種早期診斷的良好方法。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒安全性:
1.避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請盡快用水沖洗。
2.實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3.不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4.試劑應按標簽說明書儲存,使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄,不可保存。
5.實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質。
6.不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。
7.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時,避免使用帶金屬部分的加樣器。
8.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9.洗滌酶標板時應充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標反應孔中吸水。
10.底物A應揮發(fā),避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感,避免長時間暴露于光下。避免用手接觸,有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。
11.加入試劑的順序應一致,以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。
12.按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA 檢測試劑盒操作步驟:
實驗開始前,各試劑均應平衡至室溫,試劑不能直接在37 溶解;試劑或樣品配制時,均需充分混勻,混勻時盡量避免起泡。實驗前應預測樣品含量,如樣品濃度過高時,應對樣品進行稀釋,以使稀釋后的樣品符合試劑盒的檢測范圍,計算時再乘以相應的稀釋倍數。
1、 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液 100 ,余孔分別加標準品或待測樣品100 ,注意不要有氣泡,加樣 時將樣品加于酶標板底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37 溫育2小時。為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2、 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加檢測溶液A工作液 100 (臨用前配制),酶標板加上覆膜,37 溫育1小時。
3、 棄去孔內液體,甩干,洗板 3次,每次浸泡1-2分鐘,大約400 /每孔,甩干(也可輕拍將孔內液體拍干)。
4、 每孔加檢測溶液B工作液(臨用前配制)100 ,加上覆膜,37 溫育1小時。
5、 棄去孔內液體,甩干,洗板5次,方法同步驟3。
6、 每孔加底物溶液90 ,酶標板加上覆膜37 避光顯色(反應時間控制在15-30分鐘,當標準孔的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯時,即可終止)。
7、 每孔加終止溶液50 ,終止反應,此時藍色立轉黃色。終止液的加入順序應盡量與底物 液的加入順序相同。
8、 立即用酶標儀在450nm波長測量各孔的光密度( 值)。

人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELIS 試劑盒注意事項:
1.嚴格按照人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒說明書進行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。
2.加樣后及時放人孵箱。標本較多時,要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導致非特異性結合緊附于反應孔周圍,難以清洗徹底。
3.封板溫育時,各孔一定要封嚴,防止陽性標本的液體蒸發(fā),產生周邊現象從而導致“花板”的出現。
4.用洗板機洗板時,保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,這些異物在洗板的過程中易產生拖帶現象而導致“花板”的出現。
5.合理安排檢測量,以免反應板過多造成洗板等待時間長。
6.加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
7.顯色劑盡量在臨用前配制,堅持不用過期顯色劑,肉眼可見淺藍色的TMB顯色劑不用。
8.加樣時保持顯色劑不外流;A、B液應避免接觸金屬器械。加終止液時應避免產生氣泡。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA試劑盒安全性樣本實驗準備及標本的處理:
在收集樣本前都必須有一個完整的計劃,必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天就進行
檢測的樣本,及時儲存在4℃?zhèn)溆谩τ诟籼煸贆z測的樣本,及時分裝后凍存在-20℃?zhèn)溆茫袟l件的,-70℃凍存?zhèn)溆谩吮緫苊夥磸蛢鋈凇?br /> 1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如出現沉淀,應再次離心。
2. 血漿:應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應該再次離心。
3. 尿液:用無菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清,保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。
4. 細胞培養(yǎng)上清:檢測分泌性的成份時,用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。檢測細胞內的成份時,用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細胞懸液,細胞濃度達到100萬/ml左右。通過反復凍融,以使細胞破壞并放出細胞內成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應再次離心。
5. 組織標本:切割標本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩吮救诨笕匀槐3?-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉/分)。仔細收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
人谷氨酸脫氫酶(GDH/GLDH)ELISA檢測試劑盒性能特點:
1、、靈敏、特異的抗體;
2、重復性和可靠性高;
3、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相載體;
4、適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型;
5、可檢測指標齊全:細胞因子檢測、心肌梗塞檢測、內分泌檢測、肝纖維化檢測、自身免疫檢測、傳染病檢測、特種蛋白檢測、優(yōu)生優(yōu)育檢測等等;
6、價格優(yōu)惠,質量保證,zui大限度的節(jié)省實驗經費。
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