48t/96t 人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒
簡單介紹
48t/96t 人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒的詳細介紹
中文名:人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒
別名:人5羥色胺(5-HT)ELISA Kit
貨號:fk-m00215
供應商:上海古朵
規格:48t/96t
檢測方法:酶免法/酶聯免疫法(ELISA)
保存條件:2-8℃
有效期:6個月
適用范圍:僅供科研使用,不得用于臨床
用途:用于測定人血清,血漿,組織及相關液體樣本中的含量或活性。
特點:靈敏性高、特異性強、重復性好。
檢測目的:用于測定血清,血漿及相關液體等樣本,例如適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養上清、組織勻漿等標本。

(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性,又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體,也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后,底物被酶催化成為有色產物,產物的量與標本中受檢物質的量直接相關,故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度(pg-ng/ml水平),并且重復性好。以免疫學反應為基礎,將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。
人5羥色胺(5-HT)ELISA試劑盒樣本的處理方式:
1、胃液、唾液、尿液的采集方式一般現采現用,胃液、唾液的采集時間是空腹采集,一般隔夜尿不采集;
2、采集血清時,一般要加入總體積1%的抗凝劑,采集后先室溫或4℃靜置半小時后,800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存備用;
3、組織提取液、肺泡灌洗液等,采集后離心分離,800-1000rmpx5min,取上清,-20℃或4℃保存備用;
4、采集血漿時一般不加抗凝劑,采集后立即離心800-1000rmpx5min分離,取上清,-20℃或4℃保存備用;
5、不貼壁細胞(分泌性蛋白),將培養基和細胞轉移至10ml離心管,500-800rmpx10min,吸取上清至另一10ml離心管中,10000rmpx10min,-20℃或4℃保存,作為標本進行檢測,如有需要可進行透析或純化處理。
人5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒代測操作步驟:
1、加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
2、溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育30分鐘。
3、配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用
4、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此
重復5次,拍干。
5、加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。
6、顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色
10 分鐘.
7、終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。
8、測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。測定應在加終止液后15分鐘以內進行。
人5羥色胺(5-HT)ELISA檢測試劑盒代測注意事項:
1.人5羥色胺ELISA檢測試劑盒,人5-HT試劑盒檢測前,檢查各種儀器,打開酶標儀,穩定20分鐘左右。
2.檢測樣本要澄清,不能含雜物,否則會直接影響結果。
3.實驗開始前要將試劑盒取出,室溫放置30-40分鐘,使各種試劑都恢復到室溫,以使檢測結果更為穩定。
4.盡量做雙標準實驗,這樣可以保證數據的準確性。
5.底物具有毒性,終止液對皮膚有腐蝕性,要避免接觸。
6.人5羥色胺ELISA檢測試劑盒,人5-HT試劑盒實驗中,要使底物避光保存,酶標板均可拆卸,多余的部分應密封好,低溫保存。
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