人淋巴細胞功能相關(guān)抗原1,ELISA試劑盒，預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。

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中文名：人淋巴細胞功能相關(guān)抗原1(LFA-1/CD11a+CD18)ELISA試劑盒
英文名稱：Human lymphocyte function related antigen 1 (LFA-1/CD11a+CD18) ELISA Kit
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
特異性：不與其它可溶性結(jié)構(gòu)類似物交叉反應(yīng)。
樣品形式：血清 / 血漿 / 細胞培養(yǎng)上清 / 其它生物液體。
預(yù)期應(yīng)用：ELISA法定量測定血清、血漿、細胞培養(yǎng)上清或其它相關(guān)生物液體中的含量。


標(biāo)本的處理：
（1）細胞培養(yǎng)上清液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是稀釋5倍。
（2）腦脊液
根據(jù)需要用試劑盒中的標(biāo)準稀釋液稀釋樣品，然后按照說明書所述方法檢測。推薦稀釋濃度是5倍。
（3）血漿
①用EDTA2K離心收集在真空血液收集管中的血液，5,000×g，15分鐘，4℃，分離血漿樣品，然后儲存在零下80℃直到使用。
②用試劑盒中的標(biāo)準稀釋液5倍稀釋血漿以避免血漿中的干擾物質(zhì)影響檢測，按照說明書方法檢測。



人淋巴細胞功能相關(guān)抗原1,ELISA試劑盒說明書 安全性：
1． 避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體，請盡快用水沖洗。
2． 實驗中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
3． 不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。
4． 試劑應(yīng)按標(biāo)簽說明書儲存，使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過后的標(biāo)準品應(yīng)丟棄，不可保存。
5． 實驗中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質(zhì)。
6． 不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。
7． 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。
8． 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。
9． 洗滌酶標(biāo)板時應(yīng)充分拍干，不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。
10． 底物A應(yīng)揮發(fā)，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應(yīng)立即讀取OD值。



人淋巴細胞功能相關(guān)抗原1,ELISA試劑盒說明書 操作步驟：
1.標(biāo)準品的稀釋：本試劑盒提供原倍標(biāo)準品一支，用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。
40 ng/L    5號標(biāo)準品    150μl的原倍標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
20 ng/L    4號標(biāo)準品    150μl的5號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
10 ng/L    3號標(biāo)準品    150μl的4號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
5 ng/L    2號標(biāo)準品    150μl的3號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
2.5 ng/L    1號標(biāo)準品    150μl的2號標(biāo)準品加入150μl標(biāo)準品稀釋液
2.加樣：分別設(shè)空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑，其余各步操作相同）、標(biāo)準孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。
3.溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。
4.配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用
5.洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復(fù)5次，拍干。
6.加酶：每孔加入酶標(biāo)試劑50μl，空白孔除外。
7.溫育：操作同3。
8.洗滌：操作同5。
9.顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘.
10.終止：每孔加終止液50μl，終止反應(yīng)（此時藍色立轉(zhuǎn)黃色）。
11.測定：以空白空調(diào)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應(yīng)在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行。



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