人多聚ADP核糖聚合酶（PARP）ELISA試劑盒，實驗步驟，特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。

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中文名：人多聚ADP核糖聚合酶（PARP）ELISA試劑盒

英文名：Human Poly ADP ribose polymerase,PARP ELISA Kit

供應商：上海古朵

規格：48t/96t

保存：2~8℃

有效期：6個月

樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。

特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。

用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。

種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。

運輸方式：現貨供應，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨。

檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。



人多聚ADP核糖聚合酶（PARP）ELISA試劑盒注意事項：

● 試劑應按標簽說明書儲存，使用前恢復到室溫。稀稀過后的標準品應丟棄，不可保存。

● 實驗中不用的板條應立即放回包裝袋中，密封保存，以免變質。

● 不用的其它試劑應包裝好或蓋好。不同批號的試劑不要混用。保質前使用。

● 使用一次性的吸頭以免交叉污染，吸取終止液和底物A、B液時，避免使用帶金屬部分的加樣器。

● 使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。

● 底物A應揮發，避免長時間打開蓋子。底物B對光敏感，避免長時間暴露于光下。避免用手接觸，有毒。實驗完成后應立即讀取OD值。

● 加入試劑的順序應一致，以保證所有反應板孔溫育的時間一樣。

● 按照說明書中標明的時間、加液的量及順序進行溫育操作

人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA試劑盒實驗步驟 實驗操作步驟列已下：

1.準確性：標準品線性回歸與預期濃度相關系數R值，大于等于0.9900。

2.靈敏度：zui低檢測濃度小于10 pg/ml。

3.特異性：不與其它可溶性結構類似物交叉反應。

4.重復性：板內、板間變異系數均小于15%。

操作步驟：

1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。