人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒，特異性：本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。

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中文名：人卵清蛋白特異性IgG（OVA sIgG）ELISA試劑盒

英文縮寫：OVA-sIgG Elisa Kit

供應商：上海古朵
規格96T/48T

存儲條件：2-8℃

有效期：6個月

特異性：本ELISA檢測試劑盒可同時檢測天然或重組的，且與其他相關蛋白無交叉反應。

檢測種屬：人、大小鼠、兔、羊、猴、豬、豚鼠ELISA檢測試劑盒等種屬。

適用范圍：此試劑盒僅用于科研實驗，禁用于臨床


人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒 血漿樣本直接測定前處理方法：

（1）加酶抑制劑：準確采全血若干毫升，注入預冷的加有抗凝劑的塑料指形管中，迅速低溫離心，取血漿低溫保存待測。抑肽酶有液體的與固體的。固體的抑肽酶可用生理鹽水溶解。

（2）酸化處理：每毫升血漿加1mol/l HCl 0.2ml，低溫保存待測。以上兩種方法，任選一種即可。

血漿樣本的間接測定 血標本經提取后，可去除蛋白質等干擾因素，并使微量的生物活性肽濃縮，但較費時，成本也高。常用的提取方法有：

（1）柱層析提取法：有多種層析柱可供提取不同的神經肽，其中較為方便的是用Sep-pak C18層析柱提取。主要步驟：

①柱的預處理：該柱有兩頭，長頭連接注射器，可注入溶液與樣品，短頭為排出口。預處理時注入乙腈10ml。蒸餾水20ml，使柱中的生物膠活化。

②注入樣品（如血漿、腦脊液、腹水、尿等）：樣品中的水份流出，生物活性肽、蛋白及雜質等吸附在生物膠上。血漿上柱前，如先去除蛋白，可增加柱子的使用時間。

③淋洗：用4%HAC溶液100ml注入柱中，以洗去一些雜質。

④洗脫：用7ml酸性乙腈作為洗脫劑，注入柱中，把生物活性肽洗脫下來，收集在塑料指形管中。

⑤清洗：用乙腈、蒸餾水清洗柱子，以備后用。

⑥將洗脫液吹干，低溫保存待測。測定時可加入一定量的緩沖液溶解。

人卵清蛋白特異性IgG ELISA試劑盒 操作步驟：

1.標準品的稀釋與加樣：在酶標包被板上設標準品孔10孔，在一、第二孔中分別加標準品100μl，然后在一、第二孔中加標準品稀釋液50μl，混勻；然后從一孔、第二孔中各取100μl分別加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl棄掉，再各取50μl分別加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分別加標準品稀釋液50ul，混勻；混勻后從第五、第六孔中各取50μl分別加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第七、第八孔中分別取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分別加標準品稀釋液50μl，混勻后從第九第十孔中各取50μl棄掉。（稀釋后各孔加樣量都為50μl，濃度分別為1800ng/L，1200ng/L，600ng/L，300ng/L， 150ng/L）。

2. 加樣：分別設空白孔（空白對照孔不加樣品及酶標試劑，其余各步操作相同）、待測樣品孔。在酶標包被板上待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。

4. 配液：將30（48T的20倍）倍濃縮洗滌液用蒸餾水30（48T的20倍）倍稀釋后備用。

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光顯色15分鐘。

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍色立轉黃色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。