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產(chǎn)品名稱：小鼠堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA試劑盒
產(chǎn)品別名：小鼠堿性成纖維細胞生長因子(bFGF)ELISA Kit
供應(yīng)商：上海古朵
規(guī)格：48t/96t
保存：-3~8℃
有效期：6個月
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩(wěn)定、易保存，操作簡便。
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
用途：用于測定血清，血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。
運輸方式：現(xiàn)貨供應(yīng)，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨。

小鼠堿性成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒特點特點：
1.專一性強。抗原與抗體的免疫反應(yīng)是專一反應(yīng)，而免疫酶技術(shù)以免疫反應(yīng)為基礎(chǔ)，所檢測的對象是抗原（或抗體），使用的抗體除標記了酶以外，與普通抗體的免疫反應(yīng)特性并無多大差別。
2.靈敏度高。由于抗體聯(lián)結(jié)上了酶，因此，借助于酶與底物的顯色反應(yīng)，顯示抗原與抗體的結(jié)合，大大提高了檢測的靈敏性，使檢測水平接近放射免疫測定法。
3.樣品易保存。經(jīng)過酶反應(yīng)顯示的有色產(chǎn)物大多比較穩(wěn)定，因此有利于樣品的保存。
4.結(jié)果易觀察。對檢測結(jié)果即可用肉眼觀察，又可用顯微鏡觀察，也可以用分光光度計進行比色測定，還可用顯微鏡觀察。這是因為某些酶反應(yīng)產(chǎn)物能使電子密度發(fā)生改變，從而引起被檢測物的顯示。
5.可以定量測定。溶液中的抗原物質(zhì)，應(yīng)用酶免吸附技術(shù)進行比色測定，依據(jù)光密度值的變化，可以定量。預計用細胞分光光度計可對組織內(nèi)的抗原進行免疫酶技術(shù)的定量測定。
6.可以大規(guī)模測定樣品。如有成千上萬份樣品需要進行檢測，免疫酶技術(shù)都能在較短時間內(nèi)完成。
7.儀器和試劑簡單。對免疫沒技術(shù)來說，不需要熒光顯微鏡，也不需要測定放射性的特殊儀器，所用儀器及試劑均屬一般性儀器與試劑，普通實驗室及生產(chǎn)應(yīng)用單位均易購置.




小鼠堿性成纖維細胞生長因子ELISA試劑盒特點操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應(yīng)液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應(yīng)15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應(yīng)。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。



操作步驟：
1. 取出試劑盒，于室溫(20-25℃)放置15-30分鐘。實驗過程應(yīng)在室溫(20-25℃)內(nèi)進行。
2. 取出酶標板，按照標準品的次序分別加入50μl的標準品溶液于空白微孔中。
3. 空白微孔中加入50μl的樣品，空白對照加入50μl的蒸餾水；
4. 在樣品孔中加入10μl的生物素；(不含空白對照孔,切忌：生物素只加樣品孔！)
5. 在各孔中加入100μl的酶標記溶液；(不含空白對照孔)
6. 將酶標板用封口膠密封后，37℃孵育反應(yīng) 1小時；(在孵育箱中保持穩(wěn)定的溫度與濕度)
7. 充分清洗酶標板3-5次，保持各孔有充足的水壓；(濃縮洗滌液以1：100的比例與蒸餾水稀釋)
8. 酶標板洗滌后用吸水紙徹底拍干；
9. 各孔加入顯色劑A、B液各50μl；(不含空白對照孔)
10. 20-25℃下避光反應(yīng)15分鐘；
11.各孔加入50μl終止液，終止反應(yīng)；

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