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中文名：可溶性腫瘤壞死因子α受體(sTNFαR)ELISA試劑盒
供應商：上海古朵
規格：48t/96t
保存：2~8℃
有效期：6個月
樣本：血清、血漿、細胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點：敏感性高、特異性強、重復性好、試劑穩定、易保存，操作簡便。
用途：用于測定血清，血漿及相關液體樣本中相關含量或活性。
種屬：人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運輸方式：現貨供應，一般為快遞運輸，江浙滬隔天到，外地及偏遠地方三至五天時間到貨。
檢測原理：采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。



可溶性腫瘤壞死因子α受體 ELISA試劑盒 ELISA 試劑盒 17 個相關操作技巧如下：

  1. 切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
  2. 合理安排檢測量，以免反應板過多造成洗板等待時間長。
  3. 在吸取液體時，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。
  4. 務必做雙孔實驗，這樣才既能保證數據的準確性，又能反映出試劑盒的度
  5. 樣品稀釋液應用加液器加注，并經常校對其準確性。
  6. 為防止樣品蒸發，試驗時將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內，酶標板加上蓋或覆膜。
  7. 未使用完的酶標板或者試劑，請于 2-8℃ 保存。辣根過氧化物酶標記抗人 IgG 工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過的辣根過氧化物酶標記抗人 IgG 工作液。
  8. ELISA試劑盒實驗中，加樣后及時放人孵箱，標本較多時，要分批操作。按說明步驟嚴格控制操作時間，防止孵育時間人為延長，導致非特異性結合緊附于反應孔周圍，難以清洗徹底。
  9. 剩余樣品及廢棄物應經 121℃ 高壓蒸汽滅菌 30 分鐘，或用 5.0g/L 次氯suan鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
  10. 人 ELISA 試劑盒洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11. 每次實驗留一孔作為空白調零孔，該孔不加任何試劑，只是后加底物溶液及 2N H2SO4。測量時先用此孔調 OD 值至零。
  12. 手工洗板時每次加入洗滌液后。應靜置 15～30s，不要將一個酶標孑L中的洗滌液濺入另一酶標孔中，防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13. 對樣本的結果有疑問時需要使用其他檢測方法進行驗證。
  14. 沒有去離子水或雙蒸水時，可以使用娃哈哈純凈水配制溶液，切勿使用自來水。
  15. 在使用微量加樣器時，吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭，即使吸取標準品溶液。
  16. 吸取液體時速度不易太快，以免產生氣泡，人 ELISA 試劑盒吸取的量不夠準確。
  17. 吸取液體時要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸，減少誤差。




技術原理：
(1). 抗原或抗體的固相化及抗原或抗體的酶標記。
(2). 結合在固相載體表面的抗原或抗體仍保持其免疫學活性。
(3). 酶標記的抗原或抗體既保留其免疫學活性，又保留酶的活性。
(4). 受檢標本與固相載體表面的抗原或抗體起反應。再加入酶標記的抗原或抗體，也通過反應而結合在固相載體上。
(5). 此時固相上的酶量與標本中受檢物質的量呈一定的比例。
(6). 加入酶反應的底物后，底物被酶催化成為有色產物，產物的量與標本中受檢物質的量直接相關，故可根據呈色的深淺進行定性或定量分析。測定方法具有很高的敏感度（pg-ng/ml水平），并且重復性好。以免疫學反應為基礎，將抗原、抗體的特異性反應與酶對底物的催化作用相結合起來的一種敏感性很高的試驗技術。


可溶性腫瘤壞死因子α受體 ELISA試劑盒 操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，zui終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數據處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。




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