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48T/96t 亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒
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48T/96t 亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒

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產(chǎn)品名稱:48T/96t 亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒

產(chǎn)品型號(hào):48T/96t

產(chǎn)品廠商:上海古朵生物科技有限公司

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48T/96t 亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒的詳細(xì)介紹

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中文名:亮腦啡肽(LEK)ELISA 試劑盒
供應(yīng)商:上海古朵
規(guī)格:48t/96t
保存:2~8℃
有效期:6個(gè)月
樣本:血清、血漿、細(xì)胞上清液、尿液、體液、灌洗液、腦脊髓、心房水、胸房水、組織等。
特點(diǎn):敏感性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好、試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便。
用途:用于測(cè)定血清,血漿及相關(guān)液體樣本中相關(guān)含量或活性。
種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
運(yùn)輸方式:現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。
檢測(cè)原理:采用雙抗體夾心ABC-ELISA法。



樣本處理及要求:
1. 血清:室溫血液自然凝固10-20分鐘,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如出現(xiàn)沉淀,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)該再次離心。
3. 尿液:用無(wú)菌管收集,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清,保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:檢測(cè)分泌性的成份時(shí),用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
5. 組織標(biāo)本:切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測(cè),其余冷凍備用。
6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融.
7. 不能檢測(cè)含NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。

亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒 ELISA 試劑盒 17 個(gè)相關(guān)操作技巧如下:

  1. 切記在加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸干。
  2. 合理安排檢測(cè)量,以免反應(yīng)板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。
  3. 在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4. 務(wù)必做雙孔實(shí)驗(yàn),這樣才既能保證數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性,又能反映出試劑盒的度
  5. 樣品稀釋液應(yīng)用加液器加注,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性。
  6. 為防止樣品蒸發(fā),試驗(yàn)時(shí)將反應(yīng)板放于鋪有濕布的密閉盒內(nèi),酶標(biāo)板加上蓋或覆膜。
  7. 未使用完的酶標(biāo)板或者試劑,請(qǐng)于 2-8℃ 保存。辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液請(qǐng)依據(jù)所需的量配置使用。請(qǐng)勿重復(fù)使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記抗人 IgG 工作液。
  8. ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗徹底。
  9. 剩余樣品及廢棄物應(yīng)經(jīng) 121℃ 高壓蒸汽滅菌 30 分鐘,或用 5.0g/L 次氯suan鈉等消毒劑處理 30 分鐘后廢棄。
  10. 人 ELISA 試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11. 每次實(shí)驗(yàn)留一孔作為空白調(diào)零孔,該孔不加任何試劑,只是后加底物溶液及 2N H2SO4。測(cè)量時(shí)先用此孔調(diào) OD 值至零。
  12. 手工洗板時(shí)每次加入洗滌液后。應(yīng)靜置 15~30s,不要將一個(gè)酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染。甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干。
  13. 對(duì)樣本的結(jié)果有疑問(wèn)時(shí)需要使用其他檢測(cè)方法進(jìn)行驗(yàn)證。
  14. 沒(méi)有去離子水或雙蒸水時(shí),可以使用娃哈哈純凈水配制溶液,切勿使用自來(lái)水。
  15. 在使用微量加樣器時(shí),吸取不同瓶子中液體后要更換槍頭,即使吸取標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
  16. 吸取液體時(shí)速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,人 ELISA 試劑盒吸取的量不夠準(zhǔn)確。
  17. 吸取液體時(shí)要選用量程和需要量接近的微量加樣器吸,減少誤差。



亮腦啡肽(LEK)ELISA試劑盒 常見(jiàn)問(wèn)題以及解決方法:
1、試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍;
2、加樣中可能遇到的問(wèn)題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理;
3、洗板時(shí)容易造成誤差: 因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng);
4、顯色問(wèn)題: 使用了過(guò)期的顯色劑或者是顯色劑用過(guò)后放置時(shí)間太長(zhǎng),都有可能造成顯色劑不顯色。所以在進(jìn)行顯色反應(yīng)的時(shí)候,要先查看顯色劑本身的情況;
5、終止反應(yīng):在加終止劑的時(shí)候由于傾倒速度快,差生氣泡,造成假陽(yáng)性結(jié)果。所以在倒終止劑的時(shí)候要緩慢倒;
6、讀板:讀板的時(shí)候先應(yīng)該保證板的清潔干凈;
7、嚴(yán)格按照說(shuō)明書操作。




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