雞傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒是我司的熱銷產(chǎn)品之一，上海古朵生物科技有限公司是集研制開發(fā)、銷售、fu務(wù)于一體的高新技術(shù)企業(yè),公司產(chǎn)品涉及臨床快速診斷試劑、食品安全檢測劑，du品快速檢測，動物疾病防疫檢測試劑，免疫診斷試劑、臨床血液學(xué)和體液學(xué)檢驗試劑、微生物檢驗試劑、分子生物學(xué)檢驗試劑、臨床生化試劑、有機試劑等眾多領(lǐng)域。

名稱：雞傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒
英文名：Diagnostic Kit for chicken Antibodies to Infectious Bronchitis Virus (ELISA)
供應(yīng)商：古朵生物
產(chǎn)地：國產(chǎn)|進口
檢測樣本：血清
檢測方法：酶聯(lián)免疫法
產(chǎn)品規(guī)格：96T×1/盒、96T×2/盒、96T*5/盒
保質(zhì)期：12個月
儲藏：4～30℃密封干燥保存，忌冷凍，避免陽光直射。
用途：用來檢測雞血清中的禽傳染性支氣管炎病毒（IBV）抗體

雞傳染性支氣管炎抗體檢測試劑盒 【試驗原理】
臨床上，傳染性支氣管炎是一種急性、高度傳染的病毒性疾病，任何日齡的雞都可以感染。IBV的潛伏期為24-72小時。疾病侵害雞的呼吸系統(tǒng)和泌尿系統(tǒng)。青年雞表現(xiàn)為急性呼吸道癥狀及氣管損傷。死亡率可高達。血清中的病毒抗體可通過酶聯(lián)免疫的方法檢測。血清中的IBV抗體水平及整個雞群的免疫狀況可用ELISA方法進行監(jiān)測。
將滅活的抗原包被在微孔板上，加入稀釋后的血清并孵育，血清中的抗IBV抗體將與包被在微孔板上的IBV結(jié)合，形成IBV抗原-抗體復(fù)合物。然后洗掉未結(jié)合的物質(zhì)，加堿性磷酸酶標記的抗雞IgG的酶標結(jié)合物至微孔板中，酶標物將與IBV抗原-抗體復(fù)合物結(jié)合。孵育后洗掉未結(jié)合的結(jié)合物，然后加入底物溶液。底物與堿性磷酸酶反應(yīng)并生成一種黃色的產(chǎn)物，zui后終止反應(yīng)，將顏色固定。顏色的深淺可用酶標儀（405-410nm）測定。


【一個微孔板所需的試劑的量】
樣品平均吸光度值 － 陰性對照吸平均吸光度值
＝樣品與陽性對照比值（Sp）
陽性對照平均吸光度值 － 陰性對照平均吸光度值
Sp ×（100）＝ ELISA Unit （EU）              陽性對照值設(shè)為100 EU



【結(jié)果判定及EU單位說明】
IBV ELISA 值        說明
小于10EUs          IBV抗體為陰性
10-15 EUs           IBV抗體為弱陽性，應(yīng)被認為經(jīng)過免疫或暴露于IBV，油乳狀疫苗也可能引起非特異性低水平抗體。
15-75 EUs           IBV抗體適度陽性
＞75 EUs            IBV抗體強陽性


【操作步驟】
1. 將試劑回溫至室溫，通過顛倒和渦旋將試劑混勻。
2. 將1份4×樣品稀釋液加入到含3份去離子水的容器中，充分混勻，例如，30ml 4×樣品稀釋液加入到90ml去離子水中。
3. 將1份20×洗滌液加入到含19份去離子水的容器中，充分混勻，例如，25ml 20×洗滌液加入到475ml去離子水中。
4. 稀釋前將陽性對照、陰性對照和樣品震蕩均勻。
5. 陽性對照、陰性對照和樣品均需要用樣品稀釋液稀釋后使用。稀釋比例為2μl ：800μl。將移液器調(diào)到100μl，反復(fù)吹打4次使之充分混勻。
6. 將稀釋后的陰性對照、陽性對照分別加入微孔中，每種做兩個平行，每孔100μl；將稀釋后的樣品100μl分別加入孔中，室溫下靜置30分鐘。
7. 棄去微孔板中溶液，每孔加入300μl洗滌液洗滌，重復(fù)洗滌2次，在洗滌過程中防止酶標板變干。
8. 每孔立即加入100μl結(jié)合物，室溫靜置30分鐘。
9. 重復(fù)步驟7進行洗板。
10. 每孔立即加入100μl底物，室溫靜置30分鐘。
11. 不要倒掉板內(nèi)液體，每孔立即加入100μl終止液。
12. 用酶標儀雙波讀數(shù)（405nm或410nm作為主要波長，630nm或650nm為參考波長），計算結(jié)果。

 

【注意事項】

1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應(yīng)按傳染物處理。

2.終止液具有腐蝕性，應(yīng)避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。

3.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時應(yīng)恢復(fù)至室溫方可開袋，未用完的微孔板需放入有干燥劑的密封袋中保存(包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月)。

4.濃縮洗滌液在低溫時容易結(jié)晶，使用時需恢復(fù)至室溫以完全溶解。

5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。

6.用于檢測的樣品應(yīng)保持新鮮。

7.試驗結(jié)果的判定必須以酶標儀讀數(shù)為準。

8.不同批號試劑組分不得混用。

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