萊克多巴胺快速檢測試劑盒是我司的熱銷產品之一，上海古朵生物科技有限公司是集研制開發、銷售、fu務于一體的高新技術企業,公司產品涉及臨床快速診斷試劑、食品安全檢測劑，du品快速檢測，動物疾病防疫檢測試劑，免疫診斷試劑、臨床血液學和體液學檢驗試劑、微生物檢驗試劑、分子生物學檢驗試劑、臨床生化試劑、有機試劑等眾多領域。

名稱：萊克多巴胺快速檢測試劑盒
供應商：古朵生物
產地：國產|進口
樣本： 豬、牛、羊等肌肉和肝臟組織，尿樣、血清、飼料等
適應物種： 豬、牛、羊等肌肉和肝臟組織，尿樣、血清、飼料等
應用： 藥物殘留檢測
檢測方法： 酶聯免疫法
檢測限： 0.1ppb/0.05ppb
產品規格：96T×1/盒
保質期：12個月
儲藏：于2～8℃避光保存。

萊克多巴胺快速檢測試劑盒操作說明  1 原理及用途
本試劑盒采用間接競爭ELISA方法檢測尿樣、組織、飼料等樣本中的萊克多巴胺，試劑盒由預包被偶聯抗原的酶標板、辣根酶標記物、抗體、標準品及其他配套試劑組成。檢測時，加入標準品或樣品溶液，樣本中的萊克多巴胺和酶標板上預包被偶聯抗原競爭抗萊克多巴胺抗體，加入酶標記物后，用TMB底物顯色，樣本吸光度值與其所含萊克多巴胺含量成負相關，與標準曲線比較即可得出樣本中萊克多巴胺的殘留量。

2 技術指標
2.1 試劑盒靈敏度：  0.05ppb(ng/ml)
2.2 檢測下限：
    尿液樣本  …………………………… 0.05ppb
組織（處理方法一）………………… 0.2ppb
肌肉樣本（處理方法二）…………… 0.05ppb
肝臟樣本（處理方法二）…………… 0.1ppb
飼料樣本………………………………0.5ppb
2.3 交叉反應率：
萊克多巴胺  …………………………
多巴酚丁胺  ………………………… < 1%
克倫特羅    ………………………… <0.1%
沙丁胺醇    ………………………… <0.1%

3 試劑盒組成
酶標板………………………………96孔/板
標準液（綠蓋）：0 ppb、0.05ppb、0.15ppb、 0.45ppb、 1.35ppb、 4.05ppb………各1ml    
高標準液（紅蓋）：100ppb………1ml
酶標記物 (紅蓋)…………………………7ml
抗體工作液 (藍蓋)………………………10ml
底物液A (白蓋)…………………………7ml
底物液B(黑蓋) …………………………7ml
終止液(黃蓋) ……………………………7ml
20X濃縮洗滌液(透明蓋)………………40 ml
10X復溶液(黃蓋)…………………………50 ml
說明書 …………………………………1份

4 需要的器材和試劑
4.1 儀器：酶標儀、打印機、均質器 、氮氣吹干裝置、振蕩器、離心機、刻度移液管、天平（感量0.01g）
4.2 微量移液器：單道20μl-200μl，100μl-1000μl、多道300μl
4.3 試劑：正己烷、乙腈、甲醇、無水硫酸鈉

5 溶液的配制
5.1 試驗前用去離子水將20X濃縮洗滌液稀釋成工作洗滌液。（19份離子水+1份20X濃縮洗滌液）
5.2 試驗前用去離子水將10X復溶液稀釋成工作復溶液。（9份離子水+1份10X復溶液）

6 樣本前處理方法
實驗器具必須潔凈并使用一次性吸頭，以避免污染干擾實驗結果。
6.1 尿樣本處理方法
直接取50μl清亮尿樣進行測定（渾濁尿樣需要過濾或經4000r/min離心5min，以得到清亮尿樣），暫不使用的樣本應冷凍保存。
尿樣本稀釋倍數：1    檢測下限：0.05ppb
6.2 組織樣本處理方法一
    稱取均質后的組織樣本2±0.05g ，加入6ml復溶液，充分振蕩2min，室溫4000r/min以上離心10min。取50μl上清液進行分析。
樣本稀釋倍數：4    檢測下限：0.2ppb
6.3 組織樣本（肌肉和肝臟）處理方法二
稱取均質后的組織樣本2±0.05g ，加入8ml乙腈溶液，充分振蕩2min，室溫4000r/min以上離心10min。取上清液5ml，在56℃條件下氮氣或空氣流吹至完全干燥；
6.3.1 肌肉樣本：加入1ml 復溶液混合振蕩30s，取50μl用于分析。
肌肉樣本稀釋倍數：1    檢測下限：0.05ppb
6.3.2 肝臟樣本：加入2ml正己烷振蕩溶解，再加入1ml 去離子水混合振蕩30s，室溫4000r/min以上離心5min，去除上層；取50μl下層與50μl復溶液混勻；取50μl用于分析。
肝樣本稀釋倍數：2    檢測下限：0.1ppb
6.4 飼料樣本
稱取均質后的飼料樣品1.0±0.05g，加入10ml甲醇，再加入5g無水硫酸鈉，振蕩2min；室溫 4000r/min以上離心10min；
吸出離心后的上清液1ml，于56℃氮氣吹干，用1 ml復溶液溶解干燥的殘留物，再加入1mL正己烷混合30s；室溫4000r/min以上離心5min。
取50μl下層進行分析。
樣本稀釋倍數：10    檢測下限：0.5ppb

7 酶聯免疫試驗步驟
    將所需試劑從4℃冷藏環境中取出，置于室溫平衡30min以上, 洗滌液冷藏時可能會有結晶需恢復到室溫以充分溶解，每種液體試劑使用前均須搖勻。取出需要數量的微孔板及框架，將不用的微孔板放入自封袋，保存于2-8℃。
7.1 編    號：將樣本和標準品對應微孔按序編號，每個樣本和標準品做2孔平行，并記錄標準孔和樣本孔所在的位置。
7.2 加樣反應：加標準品或樣本50μl/孔到各自的微孔中，然后加酶標記物50μl/孔，再加入50μl /孔的抗體工作液，用蓋板膜封板，輕輕振蕩5秒混勻，25℃反應30分鐘。
7.3 洗    滌：小心揭開蓋板膜，將孔內液體甩干，用工作洗滌液250μl/孔充分洗滌5次，每次間隔30秒，用吸水紙拍干（拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破）。
7.4 顯    色：每孔加入底物液A 50μl，再加底物液B 50μl，輕輕振蕩5秒混勻，25℃避光顯色15分鐘。
7.5 終    止：每孔加入終止液50μl，輕輕振蕩混勻，終止反應。
7.6 測吸光值：用酶標儀于450nm處測定每孔吸光度值（建議用雙波長450/630nm）。測定應終止反應后在10分鐘內完成。

8 結果分析
8.1 百分吸光率的計算
    標準品或樣本的百分吸光率等于標準品或樣本的百分吸光度值的平均值（雙孔）除以第1個標準（0ppb）的吸光度值，再乘以，即
 百分吸光度值（%）＝    A    ×
    A0    
A—標準溶液或樣本溶液的平均吸光度值
A0—0ppb標準溶液的平均吸光度值
8.2 標準曲線的繪制與計算
    以標準品百分吸光率為縱坐標，對應的標準品濃度（ppb）的對數為橫坐標，繪制標準品的半對數曲線圖。將樣本的百分吸光率代入標準曲線中，從標準曲線上讀出樣本所對應的濃度，乘以其對應的稀釋倍數即為樣本中待測物的實際濃度。
 

 
【注意事項】
1.實驗操作時需戴手套、穿工作衣，嚴格健全和執行消毒隔離制度，各種實驗廢棄物都應按傳染物處理。
2.終止液具有腐蝕性，應避免接觸皮膚和衣物，如不慎接觸請立即用大量自來水沖洗。
3.微孔板從冷藏環境中取出時應恢復至室溫方可開袋，未用完的微孔板需放入有干燥劑的密封袋中保存(包被板開封后請于2～8℃避光保存，使用期限為1個月)。
4.濃縮洗滌液在低溫時容易結晶，使用時需恢復至室溫以完全溶解。
5.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
6.用于檢測的樣品應保持新鮮。
7.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。
8.不同批號試劑組分不得混用。

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